le Carreau de la plante verte. Les approches de l'étude du carreau

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Les Biologistes étudient les carreaux par les diverses méthodes. À la première place parmi eux il est naturel d'appeler le guet à vue direct, cependant à une telle observation cèdent seulement les plus grands carreaux. Pour plus menu on demande l'augmentation, que l'on peut atteindre à l'aide de la loupe simple (approximativement 10Х) ou le microscope ordinaire ayant le système des lentilles (jusqu'à 1000Х). Dans le microscope lumineux le carreau vivant en trois dimensions semble parfois très complexe, izmenchivym et la formation irrégulière. En aspirant à la réception du tableau plus simple et stable, les biologistes ont appris à tuer les carreaux et les garder par voie de l'immersion à quelque fixateur, par exemple au formaldéhyde. Les carreaux tués et fixés lavent, obezvozhivajut par la tenue dans l'alcool, inondent à quelque milieu dense, par exemple à la paraffine ou la matière plastique, mais puis prigotovljajut d'eux les tranches fines avec l'aide des rasoirs ou le microtome. Dans des circonstances favorables le microtome donne la possibilité de recevoir les tranches par l'épaisseur de 1 à 10 microns. Pour révéler les structures séparées cellulaires, ces tranches fines placent successivement à de divers colorants se distinguant la dissolubilité et la charge moléculaire et en conséquence de cela adsorbables différents cellulaires structures. au travail assez soigneux et l'habitude correspondante on peut recevoir par une telle voie le tableau, dans lequel les structures séparées cellulaires seront peintes différemment, nous dirons le document nucléaire - à la couleur rose, les structures cytoplasmatiques - à vert ou violet avec de différentes nuances, mais les murs cellulaires ne sont pas peints en général ou sont peints encore en quelque couleur. Presque tout de ce que nous connaissons maintenant le carreau, les savants ont éclairci notamment par ce moyen, en utilisant de diverses méthodes de la fixation du document, son coulage mercredi, les préparations des tranches et la peinture.

Encore bol'shee l'augmentation (jusqu'à 1 000 000 X) assure le microscope électronique. Dans lui au lieu du faisceau lumineux on utilise la touffe des électrons que donne la possibilité de recevoir bol'shee la permission, puisque la résolution inversement proportionnel à la longueur d'onde de l'irradiation utilisée, mais les longueurs les ondes de Brojlja des électrons sont très petits en comparaison des longueurs les ondes de la gamme visible du spectre. La limite théorique de la permission dans le microscope électronique n'atteindront pas. Cela s'exprime par ce qu'électrique ' le bruit ' dans les lentilles magnétiques focalisant la touffe des électrons, fait la représentation instable. Cependant les perfectionnements récents comptés pour réduire celui-ci ' le bruit ' (par exemple, un fort refroidissement des lentilles), permettent d'espérer que finalement au microscope électronique réussira à atteindre la permission encore plus grande.

Pour la microscopie électronique des carreaux inondés à la matière plastique prigotovljajut les tranches fines à l'aide des couteaux de diamant ou en verre. Puis les tranches travaillent par tels réactifs, comme chetyrehokis' de l'osmium; ces réactifs est électoral se joignent à de diverses structures cellulaires et les font dans une différente mesure opaque pour les électrons. Après cela sur la plaque photographique ou sur l'écran fluorescent étudient les détails du tableau reçu. Les structures sur les microphotographies électroniques ne sont pas peintes - eux noir, blanc ou gris; recevoir les représentations colorées nous n'ont pas appris encore.

Encore un moyen de la réception de l'information sur les carreaux est lié à l'étude chimique mis en relief cellulaire organell. Si frotter prudemment la masse cellulaire dans le milieu correspondant, au moins on peut mettre en relief la partie cellulaire organell à intaktnom l'aspect. Organelly, ayant une diverse densité, divisent par la centrifugation au nombre augmentant constamment des chiffres d'affaires (fig. 2.1). Par exemple, telles particules lourdes, comme du noyau et le chloroplaste, sont assiégés à de relativement petites vitesses correspondant aux forces centrifuges, à 1000-3000 fois excédant la force de l'attraction terrestre (1000-3000 g); mitohondrii passent au dépôt environ à 10 000 g, ribosomy - approximativement à 30 000 g, mais pour les particules plus menues et pour de grandes molécules peut être nécessaire et encore à 100 fois la grande vitesse de la centrifugation. centrifugation Différentielle à côté d'autres méthodes (le filtrage à degrés, l'absorption physique et l'élution ou la division par la valeur de la charge électrique) permet de recevoir dans les quantités suffisantes les aspects séparés cellulaire organell ou leurs fragments. Reçu du chloroplaste, mitohondrii, ribosomy, les membranes et d'autres fragments sont utilisés puis pour les expériences, le but de qui comprend pour définir la nature chimique et l'activité biochimique de chacun de ces factions mises en relief.