Аўксін. Вызначэнне ўтрымання гармонаў у расліне

Вы знаходзіцеся: Аўксін

Для колькаснага вызначэння аўксіну ў любой тканіне расліны гэту тканіну экстрагуюць якім-небудзь растваральнікам, а затым наносяць экстракт на іншую тканіну, якая колькасна рэагуе на які змяшчаецца ў ім аўксін. Звычайна гэту тканіну змяшчаюць у диэтиловый эфір пры тэмпературы каля 0°С і асцярожна падтрасаюць на працягу 2-4 ч. Атрыманую эфірную выцяжку затым канцэнтруюць да невялікага аб'ёму і ўводзяць у агаровый блок, які змяшчаюць на адзін бок адчувальнага да аўксіну декапитированного органа. Звычайна для гэтай мэты выкарыстоўваюць похву першага ліста, ці да-леоптиль, выгадаванага ў цемры аўса. Асіметрычна размешчаны аўксін узмацняе ў доследнай расліне рост толькі той тканіны, якая знаходзіцца непасрэдна пад ім. Нераўнамерны рост двух бакоў колеоптиля прыводзіць да адукацыі выгіну, кут якога прама прапарцыйны колькасці ўведзенага ў блок аўксіну. Такім чынам, для колькаснага вызначэння аўксіну ў невядомым органе з яго рыхтуецца выцяжка, якая наносіцца на адчувальны да аўксіну орган. Узніклы выгін вымяраецца і параўноўваецца з выгінамі, выкліканымі вядомымі колькасцямі аўксіну ў іншых серыях досведаў. Апісаны метад выкарыстання зваротнай рэакцыі арганізма для вымярэння колькасці хімічнага злучэння, які змяшчаецца ў выцяжцы, завецца биотестом.

Биотесты, заснаваныя на індукцыі вызначанага ўзроўня зваротнай рэакцыі, якая развіваецца звычайна ў раслін пад уздзеяннем дадзенага гармона, існуюць для ўсіх раслінных

гармонаў. У наш час іх паступова выцясняюць хімічныя і фізічныя метады галоўным чынам таму, што, хоць биотесты і простыя ў выкананні, яны схільныя ўздзеянню цэлага шэрагу вонкавых фактараў. Агульным недахопам биотестов з'яўляецца, напрыклад, тое, што з тканіны разам з гармонамі часта экстрагуюцца якія інгібіруюць злучэнні. Такая сумесь выклікае больш слабую роставую рэакцыю, чым тая, якая магла б паўстаць пад уздзеяннем дадзенай колькасці роставага гармона ў адсутнасць інгібітараў. У выніку звесткі пра ўтрыманне ў тканіны вызначанага гармона апыняюцца хібнымі. Большасць сучасных метадаў заснавана на ачыстцы гармонаў, якія змяшчаюцца ў атрыманым экстракце, храматаграфічнымі метадамі, такімі, як хроматография на паперы, у тонкіх пластах силикагеля ці на калонках з шарыкамі з сінтэтычнай смалы. Самым адчувальным метадам з'яўляецца газавая хроматография. Пры яе выкарыстанні лятучае вытворнае гармона адлучаецца ад прымешак падчас яго мінання з токам газу пры падвышанай тэмпературы праз калонку з матэрыялам, які па-рознаму паглынае гармон і прымешкі. Іншы сучасны метад - вадкасная хроматография пры высокім ціску. У гэтым метадзе раствор гармона з прымешкамі пад ціскам праходзіць праз калонку, запоўненую матэрыялам з рознай поглотительной здольнасцю ў адносінах да гармона і прымешкам. Паколькі ва ўсіх гэтых метадах для мінання гармона і прымешак праз калонку патрабуецца розны час, гармон чысціцца і яго можна вызначыць непасрэдна. Як у газавай, так і ў вадкаснай хроматографии пад высокім ціскам гармон можна выявіць і ідэнтыфікаваць пасля ачысткі. Фізічны дэтэктар таго ці іншага тыпу выконвае гэту аперацыю адразу ж пасля выйсця вызначаных злучэнняў з калонкі. ИУК, напрыклад, можна выявіць і колькасна вызначыць, вымяраючы пры вызначанай даўжыні хвалі флуарэсцэнцыю, якая ўзбуджаецца пры апрамяненні раствора ўльтрафіялетавымі прамянямі з вызначанай даўжынёй хвалі. Гиббереллины ідэнтыфікуюць з дапамогай мас-спектрометра, у які гэтыя злучэнні паступаюць непасрэдна з калонкі газавага храматографа. Мас-спектрометр - складана ўладкованы прыбор - выкарыстоўваецца для таго, каб расшчапіць усе малекулы доследнага рэчыва на мноства малекулярных іёнаў (іянізацыю праводзяць шляхам бамбавання рэчыва пучком электронаў ці іншымі спосабамі), якія затым падзяляюцца ў адпаведнасці з велічынёй стаўлення іх масы да зарада. Паколькі якія рэгіструюцца наборы фрагментаў (малекулярных іёнаў) характэрны для вызначаных зыходных малекул, з дапамогай гэтага прыбора можна ідэнтыфікаваць і колькасна вызначыць любы гармон.